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Metodologie biochimiche. Principi e tecniche per l'espressione, la purificazione e la caratterizzazione delle proteine di Maria Carmela Bonaccorsi, Roberto Contestabile, Martino Di Salvo

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Autore: Maria Carmela Bonaccorsi, Roberto Contestabile, Martino Di Salvo
Editore: CEA (Casa Editrice Ambrosiana)
Data di Pubblicazione: 2019
Edizione: 2
ISBN: 9788808520586
Pagine: 336


Metodologie biochimiche è destinato agli studenti che si avvicinano per la prima volta alle tecniche – molto numerose e spesso complesse – per l’isolamento, l’analisi e la produzione delle macromolecole biologiche. Invece di fornire una serie di schede tecniche sulle singole metodologie, gli autori propongono un percorso di apprendimento progressivo e originale, che ricalca la sequenza di studi che realmente viene fatta in un laboratorio di ricerca. In questo modo, gli studenti acquisiscono una visione d’insieme delle procedure per lo studio delle biomolecole, oltre a imparare le singole nozioni teoriche e pratiche per comprendere e applicare la disciplina. Il libro si focalizza principalmente sulle strategie e sulle tecniche di espressione, purificazione e caratterizzazione delle proteine. I primi due capitoli introducono lo studente alle basi del metodo scientifico, alla strumentazione e alla sicurezza in laboratorio, per poi passare ai metodi di espressione delle proteine ricombinanti, proseguire con le tecniche di purificazione (alle quali sono dedicati tre capitoli, due sulle basi teoriche e uno con numerosi esempi pratici), e terminare con le principali metodologie per la caratterizzazione delle proteine (comprese le tecniche spettroscopiche, di analisi dell’attività enzimatica e delle interazioni molecolari). Questa seconda edizione si arricchisce con le integrazioni suggerite dai docenti che hanno apprezzato e utilizzato l’edizione precedente. In particolare, la parte relativa alle biotecnologie per la produzione in vitro di proteine è stata ampliata e approfondita e ora si estende su due capitoli, uno dedicato al clonaggio e alla mutagenesi, l’altro ai diversi sistemi di espressione. Inoltre, un capitolo interamente nuovo è dedicato alla spettrometria di massa per lo studio delle proteine, tecnica che sta acquisendo sempre maggiore importanza e diffusione.

Indice

- Introduzione alle metodologie biochimiche
- Lavorare in laboratorio
- Produzione di proteine ricombinanti: clonaggio e mutagenesi
- Produzione di proteine ricombinanti: sistemi di espressione
- Metodologie per la purificazione delle proteine: tecniche di separazione
- Metodologie per la purificazione delle proteine: tecniche di analisi
- Esempi di purificazione di proteine
- Metodi spettroscopici per lo studio delle proteine
- La spettrometria di massa per lo studio delle proteine
- La cinetica enzimatica nello studio dei meccanismi di reazione
- Metodi biochimici nell’analisi delle interazioni molecolari